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 Wysłany: Pon 19:21, 28 Lut 2011 Temat postu: supra for sale 抗人白ń |
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抗人白细胞介素—18单克隆抗体的制备
物流行病研究所，北京100071)白细胞介素．18[](简称IL．1 原名IGIF(IFN．inducingfactor)，是从小鼠及人的肝细胞中克隆到的一种新的细胞因子，经ICE(IL一1DconveringeI卜zyme)水解去除其前体蛋白N．端的前导序列而被活化。IL．18可显著刺激TH细胞产生一IFN，增强NK细胞和FasL介导的细胞毒效应，同时在细胞免疫介导的细胞损伤中也可能起重要的作用。IL-18在肿瘤、自身免疫性疾病及抗炎症治疗中，可能具有潜在的应用前景。1材料和方法1．1材料和试剂重组人IL-18由我室克隆、表达和纯化(全文另发)，相对分子质量(Mr)为l8000，纯度达电泳级，具有生物学活性。HRP标记的羊抗鼠IgG抗体为Gibco公司产品。胎牛血清为Hy．clone公司生产。Sp2／0骨髓瘤细胞为本室传代保存。Balb／c小鼠由本院动物中心提供。1．2抗IL-18m的制备免疫动物、细胞融合、筛选、克隆及腹水制备,supra for sale，均按常规方法进行。1．3mAb的特性鉴定①mAb亚类的鉴定采用ELISA。②效价测定采用间接ELISA法。③特异性鉴定用IL．18抗原和大肠杆菌M15蛋白进行ELISA交叉反应试验。2结果和讨论应用B淋巴细胞的杂交瘤技术泌抗IL一【8mAb的杂交瘤细胞，狰z一,ghd piastre；3IL．18E6、IL18C7、IL一18D9、IL一18H1和rLl8E5。培养上清液和腹水中抗IL-18mAb的效价分别为：64×10一一5．12×10和2．56×10一～1．28×l0～。6株mAb中属于IgG1、Ig2a和Ig2b者各2株，轻链均为K链。分别应用IL．18(5mg／L)和大肠杆菌蛋白M]5(1：100)包被,moncler uomo，与6株mAb进行交叉反应试验，结果只与IL．18蛋白起反应，与M15无交叉反应,tory burch shoes。鉴于IL-18在抗肿瘤、炎症及自身免疫性疾病的治疗中有潜在的应用前景,true religion，如可刺激TH型细胞产生3'-IFN，增强NK细胞的细胞毒话性；另一方面，IL．18抑制剂可能在防止细胞免疫介导的组织炎症性免疫损伤中具有应用前景。因此，抗IL．18mAb的研制成功，为探讨IL．18的作用机制及临床应用奠定了基础。
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